常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括A、质粒的小量快速提取B、DNA序列测定筛选C、插入失活筛选D、杂交筛选E、α互补筛选

作者: rantiku 人气: - 评论: 0

问题常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括

选项 A、质粒的小量快速提取 B、DNA序列测定筛选 C、插入失活筛选 D、杂交筛选 E、α互补筛选

答案 A

解析 DNA重组体的筛选常用的方法有6种。①生物学方法：A.表型筛选法，通过插入失活标记表型筛选阳性克隆。B．抗药性标志的筛选，克隆载体带有抗药性标志基因，转化后能在含该抗生素的平板上形成菌落，以区别转化菌与非转化菌。②β-半乳糖苷酶系统筛选：重组子由于基因插入使。α肽基因失活，不能形成α互补，在含Xgal的平板上，含阳性重组子的细菌为无色菌落或噬菌斑。③菌落快速裂解鉴定法：从平板上直接挑选菌落裂解后，直接电泳检测载体质粒大小，判断有无插入片段存在。④内切酶图谱鉴定：经初筛鉴定有重组子的菌落，小量培养后，再分离出重组质粒或重组噬菌体DNA，用相应的内切酶切割，释放出插入片段。⑤通过聚合酶链反应筛选重组子：利用外源DNA插入位点两侧存在特定的序列作为引物，进行PCR分析，迅速扩增插入片段，判断是否阳性重组子，并对插入进行DNA序列分析。⑥菌落或噬菌斑原位杂交：将转化菌落或噬菌斑铺在硝酸纤维素膜或琼脂平板上，经转移后用标记的特异DNA探针进行分子杂交，挑选阳性菌落。

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常用于从转化菌中筛选DNA重组体的方法不包括A、质粒的小量快速提取B、DNA序列测定筛选C、插入失活筛选D、杂交筛选E、α互补筛选

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